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傳統(tǒng)的單個(gè)核細(xì)胞分離方法需要在滴加血液和提取單個(gè)核細(xì)胞的過(guò)程中十分謹(jǐn)小慎微,需要使用無(wú)閘減速的離心方式,增加了實(shí)驗(yàn)的難度,且耗費(fèi)大量的時(shí)間,整個(gè)單個(gè)核細(xì)胞提取過(guò)程需要耗時(shí)1個(gè)小時(shí)左右。PBMC分離管 能夠?qū)⑸鲜鰰r(shí)間縮短到15分鐘,且無(wú)需采取謹(jǐn)小慎微的操作方式,降低了實(shí)驗(yàn)難度,節(jié)約了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。本產(chǎn)品可以適用于臍帶血,骨髓,外周血樣本。
l 簡(jiǎn)便:分離液倒入分離管后,直接倒入抗凝血,無(wú)需采取謹(jǐn)小慎微的操作方式。
l 快捷:將傳統(tǒng)的約一小時(shí)分離時(shí)間縮短至15分鐘。
l 安全無(wú)毒:所用介質(zhì)的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,無(wú)細(xì)胞毒性和組織毒性。
操作步驟
1. 使用移液管(槍?zhuān)┪?5ml淋巴細(xì)胞分離液注到50ml分離管下室(15ml分離管吸取4ml)。注意 : 請(qǐng)用移液管直接將淋巴細(xì)胞分離液通過(guò)隔板小孔注到分離管下室,勿將分離液置于分離管上室,否則分離液難以流至下室,影響后續(xù)分離操作。
2. 在50ml分離管中倒入15-30ml稀釋血液樣品(15ml分離管倒入3-8ml),亦可直接在分離管中倒入平衡鹽溶液進(jìn)行稀釋。
3. 在800g條件下離心10分鐘。
4. 離心后,管內(nèi)樣品從上往下分層如下:血漿-單核細(xì)胞-分離液-隔層-分離液-紅細(xì)胞。
5. 直接將隔板上層液體快速傾倒入另一無(wú)菌離心管中(有少許紅細(xì)胞貼于隔層上方為正?,F(xiàn)象,因其離心后貼壁不會(huì)隨上層液體傾倒出來(lái))。
6. 注意 : 傾倒隔板上層液體時(shí)需迅速,且一次性完成,勿反復(fù)傾倒。
7.加入15ml PBS, 用移液管重懸清洗細(xì)胞。室溫300g離心5分鐘。
8. 重復(fù)第6步一到兩次,獲得單個(gè)核細(xì)胞可以凍存或進(jìn)行下游分析和培養(yǎng)。
運(yùn)輸與保存:常溫運(yùn)輸。
質(zhì)量把控:
本產(chǎn)品通過(guò)環(huán)氧乙烷滅菌,并通過(guò)鑒定以下指標(biāo)確保其質(zhì)量:
l 無(wú)菌檢測(cè)(包括細(xì)菌,真菌)
l 支原體檢測(cè)
l 分離性能測(cè)試
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